貂肺上皮細胞的培養(四)
5）內皮細胞培養
1．取產后的新鮮臍帶。如不立即培養可以保存于4℃中，但不宜超過12小時。無菌剪取長10～15厘米一段。其它如胚胎和幼體動物的大血管，亦可用于培養。
2．(貂肺上皮細胞)先用三通注射器吸溫PBS液注入臍帶的靜脈中，洗除殘血，注入口處宜用線繩結扎，以防液體返流。
3．用血管鉗夾緊臍帶一端，從另端向臍靜脈中徐徐注入*終濃度為0.1%的膠原酶，待末端出現液體后結扎之，令充滿血管，注入口亦應結扎，以防液體返流，消化3～10分鐘。
4．(貂肺上皮細胞)吸出含有內皮細胞的消化液，注入離心管中，為獲取更多細胞，可再注入溫PBS沖洗2～3次徹底清除干凈殘余細胞，一并注入離心管中離心。
5．吸除上清，加1640培養液，制成細胞懸液，接種入瓶皿中培養，順利時2～3天內細胞即可長成單層。
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